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分光光度法顯色反應及顯色條件的選擇

日期:2021-01-22 23:20:00 作者:admin

  分光光度法進行比色分析或光度分析時,首先要把待測組分轉變成有色化合物,然后進行比色或光度測定。將待測組分轉變成有色化合物的反應叫顯色反應,與待測組分形成有色化合物的試劑稱為顯色劑。
  一、顯色反應的選擇
  顯色反應分兩類,即絡合反應和氧化還原反應,絡合反應是zui主要的顯色反應。
  選用的原則是:
  1、選擇靈敏的顯色反應。摩爾吸光系數ε的大小是顯色反應靈敏度高低的重要標志,因此應當選擇生成的有色物質的ε較大的顯色反應。一般來說,當ε為104-105時,可認為該反應靈敏度較高。
  2、盡可能選擇選擇性好的顯色劑。即顯色劑僅與一個組分或少數幾個組分發生顯色反應。
  3、顯色劑在測定波長處無明顯吸收。通常把兩種有色物質zui大吸收波長之差稱為對比度,一般要求顯色劑與有色化合物的對比度在60nm以上。
  4、反應生成的有色化合物組成恒定,化學性質穩定。
  二、顯色條件的選擇
  吸光光度法測定的是顯色反應達到平衡后溶液的吸光度,因此要得到準確的結果,必須從研究平衡著手,了解影響顯色反應的因素,控制適當的條件,使顯色反應完全和穩定。
  1、根據溶液平衡原理,有色絡合物的穩定常數越大,顯色劑過量越多,越有利于待測組分形成有色絡合物。但是過量顯色劑的加入有時會引起副反應,對測定反而不利。
  2、酸度對顯色反應的影響是多方面的。一種金屬離子與某種顯色劑反應的適宜酸度范圍是通過實驗來確定的。確定的方法是固定待測組分及顯色劑的濃度,改變溶液pH值,測定其吸光度,作出吸光度-pH值關系曲線,選擇曲線平坦部分對應的pH值作為測定條件。
  3、顯色反應一般在室溫下進行,有的反應需要加熱,以加速顯色反應,使之進行完全。
  4、大多數顯色反應需要經過一定的時間才能完成,其長短與溫度的高低有關,也會受到空氣的氧化或發生光化學反應使眼色顏色減弱。因此必須通過實驗作出在一定溫度下的吸光度-時間關系曲線,得到適宜的顯色時間。

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